Enthüllung der Geheimnisse eines 2900

Scientific Reports Band 13, Artikelnummer: 13092 (2023) Diesen Artikel zitieren

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Die jüngste Entwicklung von Techniken zur Sequenzierung antiker DNA hat wertvolle Einblicke in die Zivilisationen vor uns geliefert. Das volle Potenzial dieser Methoden muss jedoch noch ausgeschöpft werden. Wir haben alte DNA aus einer kürzlich freigelegten Bruchfläche eines Tonziegels extrahiert, der aus dem Palast von König Ashurnasirpal II. (883–859 v. Chr.) in Nimrud, Irak, stammt. Wir haben 34 einzigartige taxonomische Pflanzengruppen entdeckt. Mit dieser Forschung haben wir die bahnbrechende Entdeckung gemacht, dass alte DNA, die in einer Tonmasse wirksam vor Kontamination geschützt ist, erfolgreich aus einem 2900 Jahre alten Tonziegel extrahiert werden kann. Wir fördern zukünftige Forschungen zu diesem Thema, da die wissenschaftlichen Aussichten für diesen Ansatz beträchtlich sind und möglicherweise zu einem tieferen Verständnis antiker und verlorener Zivilisationen führen.

In der Nähe des Flusses Tigris, außerhalb der antiken Stadt Kalhu, die heute als Nimrud bekannt ist, bereitete ein Ziegelmacher einst einen Lehmziegel für den Bau eines neuen Palastes vor, der seinem König Ashurnasirpal II. (ca. 883–859 v. Chr.) gewidmet war. Er wusste nicht, dass dieser unbedeutende Tonziegel fast 2900 Jahre später als einzigartige Zeitkapsel dienen würde, die durch die moderne Untersuchung der alten DNA, die für Tausende von Menschen verborgen und konserviert wurde, Details der Flora dieses bestimmten Gebiets und dieser Zeit enthüllen würde Jahre.

Diese Untersuchung präsentiert die Entdeckung antiker DNA (aDNA) in Proben eines etwa 2900 Jahre alten Tonziegels, der im Dänischen Nationalmuseum aufbewahrt wird. Wir stellen eine neuartige Anwendung der aDNA-Analyse und ihre Ergebnisse vor und diskutieren die identifizierte Flora im Zusammenhang mit der reichen Fülle an Textbeweisen aus dem antiken Mesopotamien (ungefähr dem heutigen Irak und Syrien), um unsere Ergebnisse in breitere aktuelle Diskussionen darüber einzuordnen die Domestizierung von Pflanzen in diesem Gebiet. Der betreffende Ziegel (Museumsnummer 13854) wurde 1958 von der Rask Ørsted Stiftung dem Dänischen Nationalmuseum gespendet. Es wurde bei den britischen Ausgrabungen in Nimrud ab 1949 entdeckt. Der Assyriologe Jørgen Læssøe sicherte sich die finanzielle Unterstützung der staatlich finanzierten Rask Ørsted-Stiftung, die es ihm und anderen Dänen ermöglichte, an den Ausgrabungen teilzunehmen. Im Jahr 1958 erhielt das Nationalmuseum als Dank für die Unterstützung eine Gruppe von Objekten von Nimrud, darunter den betreffenden Ziegelstein. Als es in die Sammlung des Dänischen Nationalmuseums gelangte, war es bereits horizontal in zwei Teile zerbrochen. Aufgrund ihres Zustands wirken Lehmziegel scheinbar solide, sind jedoch von Natur aus empfindlich. Bei einer ansonsten kontrollierten Handhabung im Jahr 2020 spaltete sich leider die untere Hälfte des Ziegels vertikal in zwei Teile. Dieses Ereignis bot die Gelegenheit für eine wissenschaftliche Untersuchung von nicht kontaminiertem Ton, der mit relativer Sicherheit datiert werden konnte. Aus diesem neuen, nicht kontaminierten Bruch wurden die Proben für diese Studie entnommen (Abb. 1).

Der Tonziegel, aus dem die Proben stammen. Bilder des Tonziegels aus dem Dänischen Nationalmuseum (Museumsnummer 13854) und der fünf Probenahmestellen auf der Oberfläche des Bruchs. Das gelbe Quadrat im oberen Teil der Abbildung stellt das unten abgebildete Ziegelstück dar.

Der Ziegel besteht hauptsächlich aus Schlamm, der vor Ort in der Nähe des Flusses Tigris gesammelt und mit botanischem Material wie Spreu, Stroh oder Tiermist vermischt wurde. Er wurde in einer Form geformt, bevor er mit sogenannten Keilschriftzeichen beschriftet wurde, die einen Dialekt des Jetzt widerspiegeln ausgestorbene semitische Sprache Akkadisch, danach wurde es zum Trocknen in die Sonne gelegt1,2. Lehmziegel mit keilförmigen Inschriften wurden traditionell von Herrschern im alten Mesopotamien vom späten 3. bis zum späten 1. Jahrtausend v. Chr. für den Bau monumentaler Gebäude verwendet, und heute sind Tausende dieser Ziegel bekannt. Aufgrund der Inschrift, die ihn als „Eigentum des Palastes von Ashurnasirpal, König von Assyrien“ identifiziert, ist es möglich, diesen speziellen Ziegel innerhalb eines Jahrzehnts zu datieren. Der Text liefert dem König auch eine Genealogie, die ihn chronologisch sicher in eine Liste bekannter Herrscher einreiht. Der Bau des Palastes von Ashurnasirpal II. im antiken Kalhu (heutiges Nimrud) – heute als Nordwestpalast bekannt – feierte die Stadt zu Beginn des Neo-Assyrischen Reiches als neue Hauptstadt Assyriens, und mit dem Bau wurde ungefähr begonnen 879 v. Chr.3. Die absolute Chronologie der neuassyrischen Zeit (ca. 883–612 v. Chr.) ist in weiten Teilen gut etabliert und basiert auf erhaltenen Listen auf Keilschrift-Tontafeln, anhand derer es möglich ist, Regierungsjahre eines Königs mit dem Namen eines Königs in Verbindung zu bringen bestimmter Beamter seiner Regierung4. Diese Daten sind mit astronomischen Ereignissen verknüpft, die zu bestimmten Zeitpunkten, insbesondere im 7. Jahrhundert v. Chr., aufgezeichnet wurden5. Die Daten, die wir aus diesem Ziegelstein gewonnen haben, boten eine völlig neue Möglichkeit, verschiedene Aspekte des 9. Jahrhunderts v. Chr. zu untersuchen.

Die erste Verwendung alter DNA (aDNA) geht auf das Jahr 1984 zurück, als getrocknetes Muskelgewebe einer ausgestorbenen Art erstmals aus Museumsproben sequenziert wurde6. Seitdem haben aDNA-Studien einen einzigartigen Blick zurück in die Zeit, in den Genomgehalt ausgestorbener Tierarten und des Menschen, sowie archäozoologische und archäobotanische Studien an verschiedenen erhaltenen Exemplaren ermöglicht7. Unsere Studie stellt ein neues Material dar, aus dem aDNA in Form eines Tonziegels analysiert werden kann. Alte DNA ist aufgrund ihrer geringen Konzentration und ihres hohen Fragmentierungsgrads schwer zu extrahieren. In dieser Studie war es jedoch möglich, die aDNA mit einem direkten Zusammenhang zum Kontext und Datum zu analysieren, was uns eine Korrelation mit nahezu zeitgenössischen Textbeweisen ermöglichte lebende Pflanzen.

Die Stadt Kalhu nimmt aufgrund ihrer Ausgrabungsgeschichte einen herausragenden Platz in der Erforschung des antiken Nahen Ostens ein. Ab 1845 führte Sir Austen Henry Layard die ersten Ausgrabungen an der Stätte durch und es war zu dieser Zeit erst die zweite antike Stadt Mesopotamiens, die ausgegraben wurde. Die Erkenntnisse bildeten die Grundlage für einen Großteil der ersten Erkenntnisse über die sogenannte „Wiege der Zivilisation“, die das Fach Assyriologie prägten. Die Stätte wurde nach Layards Feldforschung regelmäßig erkundet, z. B. ab 1949 vom bekannten britischen Archäologen Max Mallowan zusammen mit seiner Frau und berühmten Autorin Agatha Christie. Innerhalb des letzten Jahrzehnts wurden die Überreste des Nordwestpalastes aufgrund der jüngsten Unruhen im Nordirak und in weiten Teilen Syriens teilweise zerstört.

Durch Extraktion und Sequenzierung der aDNA aus dem Tonziegel (siehe Materialien und Methoden) und die folgende Datenanalyse konnten wir 34 einzigartige taxonomische Gruppen von Pflanzen entdecken, die die Ordnung Laurales sowie sieben verschiedene Familien aus anderen Ordnungen repräsentieren: Apiaceae (Unterfamilie). Apioideae, Tribus Selineae), Betulaceae, Brassicaceae (einschließlich der Gattung Brassica), Ericaceae (einschließlich der Unterfamilien Ericoidae und Vaccinioideae), Poaceae (Tribus Poeae und Triticeae), Fagaceae (Gattung Quercus) und Salicaceae (Tabelle 1).

Die meisten Identifizierungen erfolgten mit Probe 5, gefolgt von den Proben 2 und 4, während Probe 3 verworfen wurde, da kein zufriedenstellendes Sequenzierungsergebnis erzielt werden konnte. Die häufigsten Pflanzenfolgen stammten aus den Familien Brassicaceae (Kohl) und Ericaceae (Heidekraut). Darüber hinaus wurden Beiträge aus den Familien Betulaceae (Birke), Lauraceae (Lorbeergewächse), Selineae (Doldenblütler) und Triticeae (Kulturgräser) beobachtet.

Kontrollproben aus den Werkbänken, die mittels DNA-Extraktion, negativer DNA-Extraktionsprobe und negativer PCR-Kontrollen verwendet wurden, führten weder zu einer Amplifikation der Pflanzen-DNA noch zu Sequenzierungsablesungen nach der Einbeziehung in den Nanopore-Sequenzierungslauf.

Alle Proben wurden außerdem mit einem kurzen DNA-Barcode analysiert, der auf Wirbeltiere abzielte, um potenzielle Quellen moderner DNA-Kontamination zu identifizieren. Bei diesen Analysen wurden als primäre Quellen Menschen und Schweine identifiziert, die beide sporadisch in allen Proben beobachtet wurden. Aufgrund dieser Beobachtung wurden die Ergebnisse dieses DNA-Barcodes nicht weiter analysiert, da die Wahrscheinlichkeit besteht, dass moderne DNA-Spuren potenzielle aDNA-Ergebnisse verdecken.

Darüber hinaus wurden die verbleibenden DNA-Extrakte aus den Proben 2 und 5 für die metagenomische Sequenzierung vorbereitet, um zu versuchen, die Ergebnisse als alte DNA-Spuren zu verifizieren, indem die charakteristischen Desaminierungsschäden an den Enden von aDNA-Molekülen untersucht wurden. Es war jedoch nicht möglich, genügend qualitativ hochwertige Messwerte zu erhalten, um diese Analyse zuverlässig durchzuführen. Die manuelle Kuratierung der 105.000 Messwerte, die nach 16 Stunden Nanopore-Sequenzierung erhalten wurden, ergab, dass ca. 0,1 % der erhaltenen Messwerte konnten aufgrund ihrer kurzen Länge (30–140 bp) Pflanzenarten zugeordnet werden, die zu den taxonomischen Gruppen gehören, die mit der Amplikonsequenzierung beobachtet wurden, und zwar mit relativ hoher statistischer Stärke.

Frühere Analysen der Flora des heutigen Irak zeigen >3300 Arten in 908 Gattungen, die zu 136 Blütenpflanzenfamilien gehören8.

Das aDNA-Screening zeigte Pflanzenarten aus sieben verschiedenen Familien, wobei die Ergebnisse aus der Ordnung Laurales ausgeschlossen wurden, da diese Sequenzen auf Familienebene nicht sicher definiert werden konnten. Wir erkennen an, dass einige der beobachteten taxonomischen Pflanzengruppen eine weite Verbreitung auf dem Planeten haben, was eine Einschränkung unserer Studie darstellt, da keine direkten Beweise für alte DNA-Spuren erbracht werden konnten. Strenge Kontrollen und Datenaufbereitung deuten jedoch stark darauf hin, dass die erhaltenen DNA-Sequenzen aus Pflanzen aus dem Tonziegel stammen, und wir werden die Ergebnisse in diesem Sinne diskutieren. Dazu gehört Apiaceae, eine Familie von Kräutern mit über 200 Gattungen und 3000 Arten9, von denen 155 Arten im heutigen Irak vertreten sind, darunter sieben endemische Arten8. Wir haben in unseren Proben Sequenzen des Stammes Selineae entdeckt, der zur Familie der Apiaceae gehört. Eine Reihe dieser im Irak vorkommenden Arten sind Nahrungspflanzen wie Daucus (Karotte), Pastinaca (Pastinaken) und Apium (Sellerie), von denen einige tödliche Alkaloidgifte enthalten (Conium spp.), während andere zum Kochen verwendet werden, ebenso wie moderne Pflanzen -Tagesmedizinische Zwecke (Carum, Foeniculum, Pimpinella, Anethum spp.).

Die Familie der Birkengewächse, Betulaceae, ist eine Familie von Laubbäumen und Sträuchern, die aus sechs Gattungen10 besteht, wobei nur eine Gattung, Betula, und eine Art, Betula pendula, heute im Irak vorkommen11. Wir haben in unseren Proben DNA-Sequenzen aus der Familie der Birkengewächse (Betulaceae) nachgewiesen. Da nur eine Art, Betula pendula, in der botanischen Zusammensetzung des heutigen Irak11 vertreten ist, und unter der Annahme, dass der Verlauf von 2900 Jahren nicht zu einer Verringerung der Anzahl der zur Gattung Betula gehörenden Arten im Irak geführt hat, können wir eine Identifizierung vorschlagen der Art Betula pendula in unseren Proben.

Die Familie der Salicaceae umfasst zweihäusige Laubbäume und Sträucher aus weichem, hellem Holz und umfasst drei bis vier Gattungen und über 500 Arten, wobei zwei Gattungen, Salix (Weide) und Populus (Pappel), im heutigen Irak vertreten sind11.

Die Familie der Fagaceae besteht aus laubabwerfenden oder immergrünen Bäumen oder Sträuchern mit einfachen, wechselständigen Blättern und umfasst sechs Gattungen und über 800 Arten, von denen heute im Irak nur vier Arten aus einer Gattung, Quercus (Eiche), vorkommen11. Daher gehen wir davon aus, dass unsere Proben eine oder mehrere der vier folgenden Arten enthalten könnten: Q. libani, Q. infectoria, Q. macranthera und Q. aegilops8,11.

Die Familie der Senf- oder Kohlgewächse oder Brassicaceae (Cruciferae) umfasst 338 Gattungen und 3709 Arten12 und ist mit 79 Gattungen und 195 Arten vertreten, darunter zehn endemische Arten im heutigen Irak8. Wir haben in den Proben DNA-Sequenzen der Gattung Brassica identifiziert. Zu Brassica gehören Gemüse wie Kohl, Grünkohl, Brokkoli, Blumenkohl, Wurzel- und Stängelfrüchte wie Radieschen, Meerrettich, Rüben, Kohlrabi und Saatfrüchte wie Senfkörner und Raps13. Im heutigen Irak kommen acht zu Brassica gehörende Arten (vier einheimische und vier kultivierte) vor: B. deflexa, B. nigra, B. juncea, B. tournefortii sowie B. oleracea, B. rapa, B. napus und B. elongata14.

Die Familie der Poaceae (Gräsergewächse) umfasst 11.500 Arten15, von denen heute 101 Gattungen mit insgesamt 264 Arten, darunter drei endemische Arten, im Irak zu finden sind8. Wir haben in unseren Proben DNA-Sequenzen der Stämme Poeae und Triticeae identifiziert. Die Gattung Poa gehört zum Stamm Poeae und ist im heutigen Irak mit 11–12 Arten vertreten16. Der Stamm Triticeae enthält mehrere der wichtigen Getreidegräser wie Weizen, Roggen und Gerste. Im heutigen Irak sind 12 Gattungen des Triticeae-Stammes vertreten, darunter Tricitum (Weizen), Hordeum (Gerste) und Secale (Roggen)16.

Die Heidegewächse Ericaceae sind mit > 100 Gattungen und > 4400 Arten eine sehr vielfältige Familie mit Lebensformen, die von Bäumen über Epiphyten und kleine Sträucher bis hin zu Kräutern ohne Chlorophyll reichen17,18. Wir haben in unseren Proben DNA-Sequenzen identifiziert, die zu den Unterfamilien Ericoidae und Vaccinioideae gehören.

Laurales, eine Ordnung meist tropischer Bäume oder Sträucher, oft mit duftendem Holz von großer Haltbarkeit, besteht aus sieben Familien, die 100 Gattungen mit etwa 2500–2800 Arten umfassen19. Die sieben Familien sind Atherospermataceae, Calycanthaceae, Gomortegaceae, Hernandiaceae, Lauraceae, Monimiaceae und Siparunaceae19.

Die Erforschung des antiken Mesopotamiens, der „Wiege der Zivilisation“, basiert hauptsächlich auf der Untersuchung schriftlicher Quellen und archäologischen Materials. Den Forschern steht ein umfangreiches Korpus an schriftlichen Quellen zur Verfügung, das aus Zehntausenden Tontafeln mit Keilschrift besteht, auf denen die alten akkadischen und sumerischen Sprachen aus dem Jahr ca. 300 v. Chr. aufgezeichnet sind. 3200 v. Chr.–75 n. Chr. Im Vergleich zu anderen archäologischen Materialien aus derselben Zeit sind die Tontafeln außerordentlich gut erhalten. Bisher war es jedoch schwierig, die in der antiken Keilschriftliteratur beschriebenen Pflanzenarten zu identifizieren, da sich die Begriffe und Konzepte von den Artennamen unterscheiden, die in der modernen Wissenschaft verwendet werden. Darüber hinaus verfügen wir nur über begrenzte visuelle Darstellungen der antiken Flora und Fauna. Diese Wissenslücke ist für das Studium der antiken Medizin problematisch, da wir die alten Namen vieler pharmazeutischer Inhaltsstoffe aus den Keilschrifttexten kennen, sie aber in einem modernen Kontext noch nicht richtig identifizieren müssen. Durch die Einführung der aDNA-Analyse als ergänzendes Instrument zur Identifizierung von Arten, die in den antiken mesopotamischen Zivilisationen vorkommen, könnte sich dieses Forschungsgebiet in den kommenden Jahren erheblich weiterentwickeln. Darüber hinaus würden zukünftige Erkundungen der hier vorgestellten Methode in benachbarten Zivilisationen ähnliche Untersuchungen in anderen antiken Disziplinen ermöglichen.

Eine Vielzahl von Bezeichnungen für die antike irakische Flora sind uns überliefert. Insbesondere Texte aus dem zweiten und ersten Jahrtausend v. Chr. sind nützlich, um unsere Daten in Bezug auf die antike Terminologie zu diskutieren, da diese Schriften uns viel Wissen über landwirtschaftliche Produkte sowie über Inhaltsstoffe vermitteln, die in medizinischen Rezepten, pharmazeutischen Mischungen und verschiedenen Ritualen verwendet werden. Insbesondere zwei Texte liefern nützliche Beweise für eine große Vielfalt an Gartenpflanzen, nämlich eine Liste importierter Pflanzen und verschiedener Gegenstände, die während der Eröffnungsfeierlichkeiten von Ashurnasirpal II. in Bezug auf seinen Palast serviert wurden, sowie eine Liste von Pflanzen aus dem Garten des babylonischen Königs Marduk-apla-iddina (biblisches Merodach-Baladan) im 8. Jahrhundert v. Chr.20,21.

Frühere Arbeiten, die moderne Begriffe für Pflanzen mit alten Wörtern korrelierten, konzentrierten sich hauptsächlich auf die Identifizierung verwandter Wörter auf Arabisch, Aramäisch und Hebräisch22, obwohl dieser Ansatz nur begrenzte Möglichkeiten für die Verknüpfung alter Terminologie mit exakten biologischen Arten bietet. Diese Untersuchung bietet eine teilweise Lösung zur Überwindung der Probleme, die mit dem Versuch verbunden sind, konkrete taxonomische Pflanzengruppen mithilfe der Linguistik zu identifizieren. Unsere Studie identifiziert das Vorkommen spezifischer Familien antiker Pflanzen in einer begrenzten Region während eines begrenzten Zeitraums, liefert jedoch keine antiken Begriffe für diese Ergebnisse. Im Folgenden diskutieren wir unsere relevantesten Ergebnisse und ordnen sie nach bestem Wissen und Gewissen den akkadischen Begriffen für die antike Flora zu. Gleichzeitig bieten wir einen Überblick über die Auswirkungen unserer Erkenntnisse auf die Geschichte der Domestizierung bestimmter Pflanzen.

Interessanterweise sind einige der in unserer Studie identifizierten taxonomischen Pflanzengruppen in der Keilschriftdokumentation ungewöhnlich, wahrscheinlich weil sie in den wichtigsten Verwaltungszentren des ersten Jahrtausends v. Chr., in denen Keilschrift verwendet wurde, nicht angebaut oder in größerem Umfang verbreitet wurden. Daher sind unsere Ergebnisse möglicherweise nicht repräsentativ für die bürokratischen Schwerpunkte der damaligen Verwaltungseinheiten oder Tempel23, sofern die Pflanzen nicht Teil einer Ernährung oder eines Pflanzenanbaus unter zentraler Verwaltung waren. Darüber hinaus ist zu erwarten, dass einige alte Pflanzentaxonomien von der modernen biologischen Klassifikation abweichen. In der Antike richtete Ashurnasirpal II. in Nimrud eine Art zoologischen Garten mit exotischen Tieren ein und importierte außerdem zahlreiche Pflanzen aus Regionen im gesamten Nahen Osten, um die landwirtschaftliche Landschaft der Region neu zu gestalten21,24,25. Allerdings wurden seine Initiativen möglicherweise vor der Fertigstellung des Palastes nicht ordnungsgemäß umgesetzt. Es bleibt daher plausibel, dass unsere Ergebnisse die lokale Flora aus der Nimrud-Region im 9. Jahrhundert v. Chr. repräsentieren, auch wenn einige der Pflanzenfamilien in der Verwaltungsliteratur aus dieser Zeit nicht vertreten waren.

Wir identifizierten neun taxonomische Gruppen im Zusammenhang mit der Kohlfamilie Brassicaceae, von denen eine der Gattung Brassica zugeordnet werden konnte. Der genaue Zeitpunkt und Ort der Domestizierung des Kohls bleibt unklar, obwohl eine aktuelle Studie darauf hindeutet, dass sie in der ersten Hälfte des ersten Jahrtausends v. Chr. in den nördlich-zentralen und nordöstlichen Mittelmeergebieten stattgefunden haben könnte26. Diese Schlussfolgerung beruhte auf dem Fehlen von Beweisen, da Textquellen und Darstellungen von Kohl, Grünkohl und Cole-Pflanzen aus dem alten Nahen Osten uns weitgehend entgangen sind26. Wir wissen, dass im Irak im ersten Jahrtausend v. Chr. verschiedene Arten von Gemüse, allgemein als Salat bezeichnet, angebaut und verzehrt wurden27. Es ist bemerkenswert, dass mehrere Arten von Grünkohl, sowohl wild als auch domestiziert, in ihrem Aussehen Salat ähneln (z. B. Brassica oleracea). Da ein oder mehrere Begriffe zur Bezeichnung von Kohl, Grünkohl und Cole-Kulturen im Akkadischen zu fehlen scheinen, obwohl unsere Ergebnisse darauf hindeuten, dass solche Arten im 9. Jahrhundert v. Chr. im Nordirak vorkamen, ist es wahrscheinlich, dass wir nach Begriffen für diese Art suchen sollten Grün gehört zu den Begriffen für Salat. Ein Beispiel ist die Pflanze namens ḪI.IZ.TUR auf Sumerisch, die in lexikalischen Listen mit den akkadischen Grüntönen guzāzu und murāru gleichgesetzt wurde. Der Name des letztgenannten Gemüses leitet sich vom Wort „bitter“ ab, das vorläufig mit „bitterer Salat“ übersetzt wurde. Sicher ist jedoch nur, dass es sich bei diesen Pflanzen um Grünpflanzen handelte, die angebaut und verzehrt werden konnten. Auf der Grundlage unserer Erkenntnisse könnte man vorschlagen, den bitteren Geschmack von Kohl mit dem Namen murāru in Verbindung zu bringen. Daher sollte die Behauptung, dass alte Keilschrifttexte Kohl, Grünkohl oder Cole-Pflanzen nicht erwähnen, möglicherweise geändert werden, da sie tatsächlich Salatarten wie Murāru auflisten, die auch als Kohlart identifiziert werden könnten28.

Eine weitere Pflanzenkategorie der Gattung Brassica ist Senf. Der akkadische Begriff kasû (sumerisch GAZIsar) wurde als „Senf“ interpretiert29. Den schriftlichen Quellen zufolge wurde sie zu verschiedenen Zeiten in großen Mengen angebaut und die Pflanze sowie ihre Produkte konnten als Aromastoff verwendet werden. Die Beschreibungen des Aussehens der Pflanze stimmen jedoch nicht genau mit denen der einheimischen Senfpflanzenarten aus dem Irak überein. Dementsprechend ziehen es mehrere Forscher vor, die Pflanze beispielsweise als Zuckerrübe, Dodder, wildes Süßholz oder Tamarinde zu identifizieren, wie kürzlich von Eypper30 diskutiert. Dennoch passt keine der Alternativen perfekt zu den Beschreibungen von Kasû, und es kann nicht ausgeschlossen werden, dass Beschreibungen des Aussehens der Kasû-Pflanze zu einer im Irak heimischen Senfart passen könnten.

Eine Art wie Rettich (Raphanus sativus), der zur Familie der Brassicaceae gehört und in unseren Proben entdeckt wurde, ist in der Keilschriftdokumentation nicht weit verbreitet, obwohl ein Wort, das wahrscheinlich als eine Form von Rettich identifiziert wird, Puglu, in Briefen und Verwaltungsdokumenten von verwendet wird in der zweiten Hälfte des dritten Jahrtausends v. Chr. und in einigen Texten aus dem ersten Jahrtausend v. Chr., darunter mindestens einem medizinischen Text27,31.

Die Identifizierung mehrerer DNA-Sequenzen der Kohlfamilie (Brassicaceae) in den untersuchten Tonziegeln (Abb. 1) legt nahe, dass die theoretische Schlussfolgerung von Maggioni et al.26, die den Ursprung der Kohlpflanzen im nördlichen Mittelmeerraum vermutet, möglicherweise zutrifft müssen geändert werden32. Obwohl solche Nutzpflanzen möglicherweise dort entstanden sind, gab es sie sicherlich im Nordirak des 9. Jahrhunderts v. Chr., also früher als die primär sprachlichen Beweise von Maggioni et al.26. Ob es sich bei unseren Erkenntnissen um Wildpflanzen oder um domestizierte Pflanzen handelt, die an den Ufern des Tigris wachsen, bleibt ungewiss.

Die Identifizierung von aDNA in unseren Proben aus der Familie Poaceae, Stamm Triticeae, könnte ein Hinweis auf das Vorhandensein einer Art wie Triticum aestivum sein. Brotweizen (Triticum aestivum) hat eine mindestens 10.000 Jahre alte Domestikationsgeschichte33. Durch den Anbau anderer Weizenarten wie Emmer und Einkorn wurde die Pflanze vor der Erfindung der Schrift im antiken Irak über Jahrtausende hinweg domestiziert34. In der akkadischen Sprache wurde Weizen kibtu (sumerisch ŠE.GIG) genannt, obwohl er in einer Zeit möglicherweise auch als aršātu bekannt war. Im heutigen Nimrud35 wurden Emmer- und Brotweizenkörner entdeckt. Weizen wird seit der Erfindung der Schrift produziert, und wir finden in den Texten immer wieder Hinweise auf Getreide und verschiedene Produktionsmethoden36. Das Kernland des antiken Assyriens – einschließlich Nimrud – im nördlichen Teil des heutigen Irak liegt in einer Klimazone, in der zeitweise Regenfeldanbau möglich wäre. Doch wie neuere Forschungen gezeigt haben, kam es im Kernland des antiken Assyriens zur Zeit von Ashurnasirpal II37 zu erhöhten Niederschlägen, was im Prinzip günstigere Bedingungen für den Anbau von Brotweizen und damit verbundenen Feldfrüchten hätte bieten können.

Diese Forschung zeigt, dass die Extraktion von aDNA aus einem Tonziegel die Erkennung einer Reihe taxonomischer Gruppen ermöglicht, die zum gegebenen Zeitpunkt und am gegebenen Ort, als der Ziegel hergestellt wurde, vorhanden waren. Der Tonziegel dient als Zeitkapsel und bietet einen einzigartigen Einblick in die Artenvielfalt einer bestimmten Zeit und eines bestimmten Ortes.

Aufgrund der Inschrift auf dem Ziegel ist es ziemlich sicher, dass der Ton, der zur Herstellung des in der vorliegenden Studie analysierten Ziegels verwendet wurde, aus der Zeit um 879 v. Chr. stammt und dass der Ton in der Umgebung der Stadt Nimrud gesammelt worden sein muss. Diese Informationen wurden in den historischen Quellen zur Verfügung gestellt, die erklären, wie mit dem Bau des Palastes um 879 v. Chr. begonnen wurde, sowie Beschreibungen der allgemeinen Praxis der Herstellung von Lehmziegeln. Unbekannt ist, wie die nachgewiesene DNA in diese bestimmte Tonmasse gelangte. Dies erschwert die Interpretation der Ergebnisse, da es mit unserer Methode lediglich möglich ist, die Anwesenheit/Abwesenheit von Arten zu beschreiben. Wenn die Daten jedoch zusammen mit den Erkenntnissen aus den zahlreichen schriftlichen zeitgenössischen historischen Quellen kombiniert und interpretiert werden, sind die mit dieser Methode bereitgestellten Informationen sehr anwendbar und stellen einen wichtigen Beitrag zur Erforschung antiker Zivilisationen dar.

Die Verwendung archäologischer Objekte als Quellen für aDNA ist nicht ohne Hindernisse, da die Methoden zur Probenentnahme invasiv sind und das Objekt, z. B. einen Zahn, oft beschädigt oder sogar zerstört wird, so dass künftigen Generationen nichts übrig bleibt, was es wertzuschätzen und zu studieren vermag. Unsere Entdeckung bietet einen völlig neuen Ansatz, da historisches Material aus Ton aus dem antiken Mesopotamien in großer Menge vorhanden ist und der Ort und die Zeitspanne der Artefakte anhand der Keilschriftinschriften auf den Objekten und der Kenntnis der archäologischen Stätten, an denen sie sich befanden, bestimmt werden kann wurden entdeckt. Darüber hinaus ermutigen wir zukünftige Studien, Methoden zu entwickeln, um Proben aus dem Kern von Ziegeln oder Tafeln zu gewinnen, ohne die Objekte zu zerstören und nur ein Minimum an sichtbaren Schäden zu hinterlassen. Die Entnahme von Proben aus dem Kern des Ziegels würde die Gewissheit bieten, dass die Proben aus einer abgeschirmten und daher nicht kontaminierten Umgebung innerhalb der Tonmasse stammen.

Die kontinuierlich beschleunigte Entwicklung der Sequenzierungstechnologie hat die aDNA-Analyse zugänglicher denn je gemacht. Sowohl die Amplikonsequenzierung kurzer genetischer Marker als auch die metagenomische Shotgun-Sequenzierung werden auf verschiedene alte und degradierte Materialien angewendet, um die taxonomische Zusammensetzung unserer Vergangenheit aufzuklären.

Die vorgestellte Studie verwendet ein modifiziertes Protokoll, das zuvor auf Materialien wie Knochen angewendet wurde, da Tonproben porös sind und eine hohe Affinität zu Nukleinsäuren aufweisen. Dies erforderte einen sanften Ansatz, um die aDNA zu extrahieren, ohne sie durch aggressive Behandlungen weiter abzubauen. Mit der angewandten Methode gelang es, Pflanzen-DNA aus den Proben eines Tonziegels zu extrahieren.

Die Wahl des DNA-Sequenzierungsansatzes und der bioinformatischen Analyse hat auch Auswirkungen auf die Ergebnisse, die erzielt werden können38. Die metagenomische Shotgun-Sequenzierung erfasst kurze DNA-Fragmente des gesamten Genommaterials in einer bestimmten Probe und ist theoretisch in der Lage, ein repräsentativeres Bild des taxonomischen Inhalts des analysierten Materials zu erfassen. Die verfügbaren Datenbanken sind jedoch auf die am besten beschriebenen taxonomischen Marker sowie europäische, nordamerikanische und ostasiatische Organismen ausgerichtet. Aus diesem Grund kann es schwierig sein, eine genaue Identifizierung aller Schrotflintendaten bereitzustellen. Darüber hinaus ist es nicht immer möglich, aDNA-Proben mit ausreichender DNA-Qualität für die Durchführung dieser Analyse aus allen Materialien ohne strenge Optimierung zu erhalten, wie beispielsweise dem hochporösen und spröden Material des in der vorliegenden Studie verwendeten Tonziegels. Die Amplikonsequenzierung konzentriert sich auf kurze Fragmente gut konservierter und gut beschriebener Gene, wie sie beispielsweise im ribosomalen Operon oder im Chloroplasten- und Mitochondriengenom vorkommen. Dies kann zu einer präzisen Identifizierung der beobachteten DNA-Varianten führen, kann aber aufgrund der geringen Bandbreite an Zielen im Vergleich zum gesamten verfügbaren Genommaterial auch zu einer Verzerrung der am häufigsten beobachteten Organismen führen. Die vorliegende Studie zeigt, dass die Amplikonsequenzierung es ermöglicht, Einblicke in die gesamten taxonomischen Gruppen von Pflanzen zu erhalten, die in sehr kleinen Fragmenten (88–421 mg) von Tonziegelmaterial vorhanden sind. Zukünftige metagenomische Studien könnten jedoch die Identifizierung einzelner Arten als Chloroplasten-DNA verbessern zwischen bestimmten Pflanzenfamilien und -gattungen bekanntermaßen gut erhalten.

Nachdem die Amplikonsequenzierung der aDNA-Proben abgeschlossen war, wurde der verbleibende aDNA-Extrakt aus den Proben 2 und 5, also denjenigen mit der erfolgreichsten Amplifikation und Identifizierung, zur Generierung eines Shotgun-Metagenoms verwendet, wobei der Ansatz der genomischen DNA-Ligationssequenzierung von Oxford Nanopore Technologies zum Einsatz kam. Da jedoch die in das Protokoll eingegebene DNA-Menge aufgrund des erwarteten DNA-Verlusts während der Bibliotheksvorbereitung bereits sehr gering war (≤ 0,1 ng/µL), war die Ausgabe begrenzt (ca. 105.000 Lesevorgänge mit einer Größe von 50–300 bp). , mit ausreichender Qualität für die Analyse). Basierend auf diesen begrenzten Daten war es nicht möglich, die charakteristischen Desaminierungs-DNA-Schadensmuster zu bestimmen, die nur für aDNA gelten. Es war jedoch möglich, kurze Fragmente pflanzlicher DNA zu gewinnen, deren Identifizierungen mit denen der taxonomischen Gruppen übereinstimmten, die in den Amplikondaten gefunden wurden. Für zukünftige Analysen wird empfohlen, die Probenahmeverfahren und die DNA-Extraktion weiter zu optimieren, um die Ausbeute zu verbessern, was wiederum die Überprüfung alter DNA-Moleküle mithilfe von auf aDNA ausgerichteter Software durch den Einsatz metagenomischer DNA-Analyse ermöglichen sollte. Aufgrund der spröden Beschaffenheit des Tons wird davon ausgegangen, dass die Probenahmegröße oder zumindest die Probentiefe wahrscheinlich erhöht werden muss, um eine ausreichende DNA-Ausbeute für eine robuste Analyse zu erreichen. Wir schlagen vor, dass alte DNA-Verfahren zur Untersuchung von Knochen, einem ähnlich porösen und spröden Material39, möglicherweise Einblicke in zukünftige Verbesserungen der aDNA-Extraktion liefern könnten.

Mit dieser Forschung haben wir die Entdeckung gemacht, dass alte DNA, die in einer Tonmasse wirksam vor Kontamination geschützt ist, erfolgreich aus einem 2.900 Jahre alten Tonziegel extrahiert werden kann. Wir haben in unseren Proben 34 einzigartige taxonomische Pflanzengruppen entdeckt. Wir haben unsere Methoden demonstriert und ermutigen zu zukünftiger Forschung zu diesem Thema, da das wissenschaftliche Potenzial dieses Ansatzes für mehrere akademische Bereiche wie antike Genomik, Assyriologie und Archäologie des Nahen Ostens, Klima und Biodiversität in historischen Kontexten erheblich ist und zu einem führen wird tieferes Verständnis alter und verlorener Zivilisationen.

Die erste Probenahme des Lehmziegels (Museumsnummer 13854) erfolgte am 7. Oktober 2020, kurz nachdem ein neuer und nicht kontaminierter Bruch im Lehmziegel aufgetreten war. Aus dem neuen Bruch wurden vier Proben entnommen. Die Probenahme erfolgte im Lagerraum des Dänischen Nationalmuseums, in dem sich die Ziegel befanden. Alle Proben wurden von TPATPA gesammelt. Während des gesamten Prozesses trug TPATPA eine Maske und Latexhandschuhe, und die Handschuhe wurden zwischen jeder Probenentnahme mit 85 % Ethanol desinfiziert. Die ersten vier Proben wurden gewonnen, indem für jede Probe sterile Skalpelle verwendet und Ton von der Oberfläche des Bruchs aufgepickt oder abgekratzt wurde. Die letzte fünfte Probe bestand aus einem Klumpen getrockneten Tons von der Grenze zwischen dem neuen und dem alten Bruch, der sich während der Handhabung beim Bewegen des Ziegels löste. Die Proben wurden direkt in fünf sterile Eppendorf-Röhrchen überführt. Die Proben wurden bei Raumtemperatur gelagert und vor Sonnenlicht geschützt, bis der Prozess der DNA-Extraktion eingeleitet wurde. Die fünf Tonstücke wogen jeweils 187, 421, 306, 88 und 272 mg.

DNA-Extraktionen wurden in einem vom Rest der molekularen Laboreinrichtungen getrennten Reinraum auf einer anderen Etage des Gebäudes unter sterilen Bedingungen durchgeführt. Die DNA-Extraktion selbst wurde in einer Laminar-Airflow-Bank mit HEPA-Luftfiltration durchgeführt, die mit 10 %iger Bleichlösung gründlich gereinigt und vor Beginn des Extraktionsverfahrens eine Stunde lang UV-behandelt wurde. Mit einem sterilen medizinischen Tupfer wurden alle Oberflächen der Bank beprobt und zusammen mit den aDNA-Proben als Kontrolle analysiert. Außer der Person, die die DNA-Extraktion durchführte, war während der Arbeiten kein Personal im Reinraum anwesend und trug stets persönliche Ausrüstung, die von Kopf bis Knie reichte. Proben wurden nur innerhalb der UV-Bank gehandhabt. Alle Oberflächen, Werkzeuge und persönlichen Schutzgegenstände wie Handschuhe und Ärmelschützer wurden regelmäßig mit 10 % Bleichmittel, 70 % Ethanol und RNAseAWAY (Thermo Fisher Scientific) sterilisiert.

Alle Proben wurden mithilfe einer Kombination aus zwei zuvor veröffentlichten Protokollen extrahiert39,40. Kurz gesagt, die Proben wurden mit 1 ml Lysepuffer (0,45 M EDTA pH 8,0, 0,25 mg·ml-1 Proteinase K, 0,5 % N-Laurylsarcosyl) bedeckt und 1 Stunde lang bei 56 °C unter Schütteln inkubiert, danach wurde der Überstand abgelassen wurde entfernt und die Lösung über Nacht bei –20 °C gelagert. Ein zweiter Lyseschritt wurde mit weiteren 1 ml Lysepuffer und einer einstündigen Inkubation bei 56 °C durchgeführt, gefolgt von einer Nacht bei 37 °C unter Schütteln. Die Proben wurden 2 Minuten lang bei 13.000 × g zentrifugiert, der Überstand wurde entfernt und mit dem Lysat aus dem ersten Lyseschritt gemischt. Anschließend wurden 2 ml 10 mM Tris-EDTA hinzugefügt und die Lysate mithilfe von Amicon Ultra 4-Säulen (30 kD) auf ~ 200 µL konzentriert. Die DNA wurde isoliert, gewaschen und unter Verwendung von MinElute-Säulen (Qiagen) gemäß den Anweisungen des Herstellers mit geringfügigen Änderungen eluiert39,40: Die Säulen wurden vor der Elution mit 60 µL EB-Puffer, der auf 60 °C vorgewärmt war, 5 Minuten bei Raumtemperatur getrocknet . Als zusätzliche Qualitätskontrolle wurde auch eine Nicht-Template-DNA-Extraktionsprobe mit dem gleichen Verfahren verarbeitet. Die DNA-Konzentration wurde mit dem Qubit dsDNA High Sensitivity Assay Kit und einem Qubit 3.0 Fluorometer (Thermo Fisher Scientific) geschätzt.

Die PCR-Amplifikationsverfahren wurden in einem Labor durchgeführt, in dem Vor- und Nach-PCR-Arbeiten getrennt durchgeführt wurden, und alle Verfahren wurden unter sterilen Bedingungen durchgeführt. Die Florazusammensetzung der aDNA im Tonziegel wurde mithilfe eines gut beschriebenen DNA-Barcodes (trnL-gh) für das Chloroplasten-trnL-Gen41 und das mitochondriale 12S-rRNA-Gen42 untersucht, wobei letzteres hauptsächlich als Kontrolle amplifiziert wurde. Die trnL-gh- und 12SV05-DNA-Barcodes wurden in fünffachen 25-µL-PCR-Reaktionen (1 × PCRBIO Ultra Mix, 400 nM des Vorwärts- und Rückwärtsprimers) mit 2 µL Template-DNA unter Verwendung des folgenden PCR-Programms amplifiziert: 95 °C für 2 Minuten , 40 Zyklen von 95 °C für 15 s, 50 °C (trnL-gh und 12SV05), 72 °C für 60 s und Enddehnung bei 72 °C für 5 min. Anschließend wurden wiederholte PCR-Reaktionen zusammengeführt. Alle erzeugten Amplifikate wurden mit CleanNGS-Perlen (CleanNA) mit einem Probe:Perlen-Verhältnis von 5:4 gereinigt und in 20 µL UV-behandeltem, nukleasefreiem Wasser eluiert. Die DNA-Konzentration wurde mit dem Qubit dsDNA High Sensitivity Assay Kit geschätzt und die Amplikongröße wurde mit D1000 High Sensitivity ScreenTapes auf einer TapeStation 2200 (Agilent) überprüft. Darüber hinaus wurden die verbleibenden DNA-Extrakte aus den Proben 2 und 5 gepoolt und für die metagenomische Sequenzierung mithilfe der Nanopore-Sequenzierung vorbereitet, wobei dieselben Protokolle wie für die Amplifikate verwendet wurden, jedoch in einer separaten Durchflusszelle.

Die Proben wurden mit einem Barcode versehen und gemäß den Empfehlungen des Herstellers (PBAC96_9069_v109_revQ_14Aug2019) für die Amplikonsequenzierung mit PCR-Barcoding unter Verwendung eines Ligation Sequencing Kit Version 109 (Oxford Nanopore Technologies) für die Nanopore-Sequenzierung vorbereitet. Die Sequenzierung wurde unter Verwendung einer R 9.4.1-Durchflusszelle durchgeführt. Die Sequenzierung wurde ca. 16 Stunden lang durchgeführt.

Die Rohsequenzierungsdaten der Amplifikate wurden mit Guppy v4.2.2 und dem R 9.4.1 High Accuracy (HAc)-Modell (https://community.nanoporetech.com) als Basecall ermittelt. Das Demultiplexen und Entfernen des Adapters wurde mit Porechop v0.2.3 (https://github.com/rrwick/Porechop) durchgeführt, mit strengen Qualitätsfilteranforderungen, bei denen alle Lesevorgänge verworfen wurden, die nicht beide Barcodes mit einem Qualitätsfaktor von mindestens 85 aufwiesen Demultiplexierte Daten wurden einer weiteren Qualitätskontrolle durch NanoPlot v1.3843 unterzogen und mit NanoFilt v2.6.043 mit einem Q-Score von mindestens 10 auf den erwarteten Größenbereich (Leselänge 50–500 bp) qualitätsgefiltert. Anschließend wurden die Lesevorgänge ausgerichtet mit minimap2 v2.1744 und mit Racon v1.3.345 poliert und anschließend mit VSEARCH v2.13.446 in Operational Taxonomische Einheiten (OTUs) mit 97 % Sequenzähnlichkeit geclustert. Die Taxonomie wurde mithilfe von BLAST47 anhand der NT-Datenbank (heruntergeladen am 08.03.2022) zugewiesen, wobei die Mindestkriterien einer Abfrageabdeckung von mindestens 60 % und eines maximalen E-Werts von 10·e-10 verwendet wurden. Repräsentative Sequenzen jedes identifizierten Organismus wurden dann manuell mit zusätzlichen Explosionssuchen kuratiert. Die Taxonomie wurde konservativ zugewiesen, im Allgemeinen nur auf Familienebene oder höher, um das Risiko einer falsch positiven Identifizierung anhand kurzer Sequenzen zu begrenzen.

Die aus der metagenomischen Sequenzierung erhaltenen Daten wurden mit den Softwareprogrammen Porechop und NanoPlot qualitätsgeprüft und gefiltert, wie oben für die Amplikondaten beschrieben. NanoFilt wurde verwendet, um alle Lesevorgänge mit einem Mindest-Q-Score von 15 auszuwählen, es wurden jedoch keine Größenfilterungs- oder Trimmschritte durchgeführt, um die kurzen Lesevorgänge zu bewahren, bei denen es sich höchstwahrscheinlich um alte DNA aus dem Tonziegel handelte. Die Daten wurden dann mit PMDtools v0.60 (https://github.com/pontussk/PMDtools) analysiert, wobei zwei verschiedene Methoden zur Erkennung von aDNA-Schadensmustern verwendet wurden. Minimap2 wurde verwendet, um die Daten auf eine Referenzgenomassemblierung von Mensch (GCF_000001405.40), Wildkohl (Brassica oleracea, GCF_000695525.1) und E. coli K-12 (GCF_000005845.2) abzugleichen, die von refseq bei NCBI als Mensch heruntergeladen wurde. Kohl und Bakterien waren die wahrscheinlichsten Quellen für die in den Proben vorhandene aDNA. Die Daten wurden mittels -Deaminierung auf Desaminierungsschäden gescannt und das Alignment wurde auch auf C-zu-T-Fehlpaarungen an den 5′- und 3′-Enden der metagenomischen Lesevorgänge analysiert.

Alle Daten wurden im Europäischen Nukleotidarchiv unter der Projektzugangsnummer PRJEB57874 verfügbar gemacht.

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Die Autoren danken dem Dänischen Nationalmuseum für die Erlaubnis, das Museumsobjekt (Museumsnummer 13854) für unsere Forschung zu nutzen, und wir danken den Fotografen Arnold Mikkelsen und Jens Lauridsen für die Erlaubnis, das Foto des Tonziegels für Abb. 1 zu verwenden Die Forschung wurde großzügig von der Carlsberg Foundation (TPA, SLR), der Aalborg Zoo Conservation Foundation (SLR) und der Edubba Foundation (TPA) finanziert.

Diese Autoren haben gleichermaßen beigetragen: Troels Pank Arbøll und Sophie Lund Rasmussen.

Abteilung für interkulturelle und regionale Studien, Universität Kopenhagen, Kopenhagen, Dänemark

Troels Pank Arbøll

Fakultät für Asien- und Nahoststudien, Universität Oxford, Oxford, Großbritannien

Troels Pank Arbøll

Linacre College, Oxford, Großbritannien

Troels Pank Arbøll & Sophie Lund Rasmussen

Wildlife Conservation Research Unit, The Recanati-Kaplan Centre, Department of Biology, University of Oxford, Abingdon, Großbritannien

Sophie Lund Rasmussen

Abteilung für Chemie und Biowissenschaften, Universität Aalborg, Aalborg, Dänemark

Sophie Lund Rasmussen, Nadieh de Jonge, Cino Pertoldi und Jeppe Lund Nielsen

Moderne Geschichte und Weltkulturen, Dänisches Nationalmuseum, Kopenhagen, Dänemark

Anne Haslund Hansen

Aalborg Zoo, Aalborg, Dänemark

Cino Pertoldi

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Konzeptualisierung: TPA, SLR, AHH, CP, JLN Methodik: TPA, SLR, CP, JLN, NdJ Untersuchung: TPA, SLR, NdJ, JLN Ressourcen: TPA, AHH, SLR, JLN Visualisierung: TPA, SLR, NdJ Formale Analyse: NdJ, JLN Finanzierungseinwerbung: TPA, SLR Datenkuration: NdJ Validierung: NdJ, JLN Projektverwaltung: TPA, SLR, JLN Aufsicht: CP, JLN Schreiben – Originalentwurf: TPA, SLR, JLN Schreiben – Überprüfung und Bearbeitung: TPA, SLR , JLN, NdJ, AHH, CP

Korrespondenz mit Troels Pank Arbøll.

Die Autoren geben an, dass keine Interessenkonflikte bestehen.

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Open Access Dieser Artikel ist unter einer Creative Commons Attribution 4.0 International License lizenziert, die die Nutzung, Weitergabe, Anpassung, Verbreitung und Reproduktion in jedem Medium oder Format erlaubt, sofern Sie den/die ursprünglichen Autor(en) und die Quelle angemessen angeben. Geben Sie einen Link zur Creative Commons-Lizenz an und geben Sie an, ob Änderungen vorgenommen wurden. Die Bilder oder anderes Material Dritter in diesem Artikel sind in der Creative-Commons-Lizenz des Artikels enthalten, sofern in der Quellenangabe für das Material nichts anderes angegeben ist. Wenn Material nicht in der Creative-Commons-Lizenz des Artikels enthalten ist und Ihre beabsichtigte Nutzung nicht gesetzlich zulässig ist oder über die zulässige Nutzung hinausgeht, müssen Sie die Genehmigung direkt vom Urheberrechtsinhaber einholen. Um eine Kopie dieser Lizenz anzuzeigen, besuchen Sie http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Nachdrucke und Genehmigungen

Arbøll, TP, Rasmussen, SL, de Jonge, N. et al. Enthüllung der Geheimnisse eines 2900 Jahre alten Lehmziegels und Entdeckung einer Zeitkapsel antiker DNA. Sci Rep 13, 13092 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-38191-w

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Eingegangen: 28. Januar 2023

Angenommen: 04. Juli 2023

Veröffentlicht: 22. August 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-38191-w

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